基线漂移

1. 柱温变化？

解决办法：控制好柱子和流动相的温度，在检测器之前使用热交换器。

2. 流动相不均匀？

解决办法：使用HPLC级的溶剂，流动相在使用前进行脱气处理。

3. 流动相配比不当或流速变化？

解决办法：更改配比或流速，为避免这个问题可定期检查流动相组成及流速。

4. 样品含有高保留的物质？

解决办法：使用保护柱，如有必要，在进样之间或在分析过程中，定期用强溶剂冲洗柱子。

5. 流通池被污染或有气体？

解决办法：用甲醇或其他强极性溶剂冲洗流通池，也可以用1N的硝酸，但不要用盐酸。

6. 检测器没有设置在*大吸收波长处？

解决办法：将波长改为*大吸收波长。

7. 柱平衡慢，特别是流动相发生变化时？

解决办法：用中等强度的溶剂进行冲洗，更改流动相时，在分析前用10～20倍体积的新流动相冲洗柱子。

基线噪音

1. 漏液？

解决办法：检查管路接头是否松动，泵是否漏液，是否有盐析出和不正常的噪音。如有必要，更换泵密封。

2. 柱温过高，检测器未加热？

解决办法：使用柱温箱，减少温度差异或加上热交换器。

3. 在流动相、检测器或泵中有空气？

解决办法：流动相脱气，冲洗系统以除去检测器或泵中的空气。

4. 流动相混合不均匀？

解决办法：用手摇动使混合均匀或使用低粘度的溶剂。

5. 流通池被污染？

解决办法：用甲醇或其他强极性溶剂冲洗流通池。

6. 检测器记录仪电子元件故障？

解决办法：断开检测器和记录仪的电源，检查并排除故障。

色谱峰前延

1. 溶剂选择不合适？

解决办法：使用流动相或者接近流动相比例作为溶剂。

2. 被保留的样品在正常的出峰前陆续出现，形成前延锋？

解决办法：减少进样量。

3. 柱子温度过低？

解决办法：升高柱子温度。

4. 色谱柱损坏？

解决办法：更换色谱柱。

色谱峰拖尾

1. 柱超载？

解决办法：减少进样量，增加柱直径采用较高容量的固定相。

2. 流动相PH选择不恰当？

解决办法：调整pH值。对于碱性物质，低pH值更有利于得到对称峰。

3. 存在干扰峰？

解决办法：

1. 使用更长的色谱柱； 

2. 改变流动相或更换色谱柱。

4. 筛板堵塞？

解决办法：

1. 反冲色谱柱； 

2. 更换筛板或色谱柱。

5. 样品被污染？

解决办法：

1. 采用有机溶剂梯度洗涤1 h以上，以冲洗柱子；

2. 更换色谱柱。

鬼峰

1. 柱子未平衡？

解决办法：重新平衡柱子，用流动相或接近流动相比例作为样品溶剂。

2. 三氟乙酸氧化？

解决办法：每天配制新鲜三氟乙酸，并加入抗氧化剂。

3. 进样阀残余峰？

解决办法：每次用后用强溶剂清洗阀，改进阀和样品的清洗。

4. 水污染(反相)？

解决办法：通过变化平衡时间检查水质量，用HPLC级的水。

峰展宽

1. 数据系统采样速率太慢？

解决办法：设定速率应是每峰大于10。

2. 检测器时间常数过大？

解决办法：设定时间常数为感兴趣第一峰半宽的10%。

3. 样品体积过大？

解决办法：用流动相配样，总的样品体积小于第一峰的15%。

4. 保留时间过长？

解决办法：等度洗脱时增加强溶剂含量，也可用梯度洗脱。

5. 检测池体积过大？

解决办法：用小体积池，卸下热交换器。

6. 柱温变化？

解决办法：增加柱温，采用低粘度流动相。

7. 柱外体积过大？

解决办法：将连接管径和连接管长度降至*小。

8. 样品过载？

解决办法：减少进样量或进低浓度的样品。

保留时间漂移

1. 柱子未平衡？

解决办法：重新平衡柱子。

2. 温度控制不好？

解决办法：采用恒温装置，保持柱温恒定。

3. 流动相发生变化？

解决办法：防止流动相发生蒸发、反应等。

保留时间快速变化

1. 流动相不合适？

解决办法：改换流动相或使流动相在控制室内进行适当混合。

2. 流速发生变化？

解决办法：重新设定流速，使之保持稳定。

3. 泵中有气泡？

解决办法：通过排气等操作将气泡赶出。

压力持续偏高

1. 筛板堵塞？

解决办法：

1. 反冲色谱柱；

2. 更换筛板或色谱柱。

2. 进样阀损坏？

解决办法：清洗或更换进样阀。

3. 保护柱阻塞？

解决办法：清洗或更换保护柱。

4. 控制器故障？

解决办法：修理或更换控制器。

5. 在线过滤器阻塞？

解决办法：清洗或更换在线过滤器。

6. 柱温过低？

解决办法：升高柱温。

7. 流速设置过高？

解决办法：及时调整流速。

灵敏度过低

1. 检测器时间常数过大？

解决办法：降低时间常数。

2. 检测池中有气泡？

解决办法：排除气泡。

3. 检测器与样品不匹配？

解决办法：根据样品的化学性质调整波长或更换检测器。

4. 检测器与记录仪超出校正曲线？

解决办法：检查检测器和记录仪，重新校正曲线。

5. 记录仪测压范围不合适？

解决办法：调整电压范围。

6. 样品量不足？

解决办法：增加样品进样量。

7. 样品未从柱子中流出？

解决办法：根据样品的化学性质改变流动相或柱子。

梯度洗脱

1. 什么是梯度洗脱？

梯度洗脱就是在分离过程中由几种不同极性的溶剂组成流动相，通过改变流动相中各溶剂的组成比例从而改变流动相的极性，使每个流出的组分都有合适的容量因子k，从而达到提高分离效果和缩短分析时间的目的。

2. 什么情况下要进行梯度洗脱 ？

（1）具有较宽k值范围的多种样品分析；

（2）相对分子质量≥1000的大分子样品分析；

（3）样品含有高保留的干扰组分，一次分析完成后进行梯度洗脱，将干扰组分洗脱出去，以免其影响下一次分析；

（4）对于不清楚使用哪种洗脱方式的情况，可以使用梯度洗脱，找到其较优的洗脱条件。

3. 梯度洗脱应注意哪些问题？

（1）注意溶剂的互溶性，不相混溶的溶剂不能用作梯度洗脱的流动相。有些溶剂在一定比例内混溶，超出一定范围后就不互溶，尤其在使用缓冲盐时需特别小心；

（2）梯度洗脱所用的溶剂纯度要求高，以保证良好的重现性。进行样品分析前必须进行空白梯度洗脱，以辨认溶剂杂质峰，因为弱溶剂中的杂质富集在液相色谱柱头后会被强溶剂洗脱下来；

（3）用于梯度洗脱的溶剂需彻底脱气，以防止混合时产生气泡；

（4）每次梯度洗脱之后必须对色谱柱进行处理，使固定相与初始流动相达到完全平衡。