一、概述

麦角甾醇，CAS号57-87-4，分子式C28H440,分子量396. 65，主要存在于真菌中，对维持真菌细胞膜完整性和流动性起重要作用的一个化合物，也是测量真菌生物量的指标。本实验以乙醇提取方法提取样品，以Waters e2695高效液相色谱仪测定植物样品中麦角甾醇含量。本方法检出限位1μg/mL。

二、服务列表

麦角甾醇检测服务列表
序号	指标	检测方法	联系我们
1	麦角甾醇	高效液相色谱法

三、样品要求

1、鲜样：新鲜、干净的植物样品，采摘样品后立即用液氮速冻，放入冻存管或用锡箔纸包起来,-80保存或干冰运输至公司。为了得到准确并符合预期的结果，尽量减少植物样品在常温下的暴露时间。

2、麦角甾醇含量测定样品质量不低于1g。

3、不同的组织部位，不同的样本类型含量差异较大，具体的样本量要求，请咨询我们的技术支持人员。

4、送检样品中不得发生霉变，使用已着生霉菌的样品进行该标准操作属于无效检测。

四、实验原理

试样经95%乙醇提取、离心后，取上清液过滤膜，经C18高效液相色谱柱分离，依据保留时间定性，用外标峰面积定量。

五、高效液相色谱参考条件

1、色谱柱: C18柱， 250 mm X 4.6 mm、5μm， 或分离效果相当的其他色谱柱；
2、 流动相: 98 %甲醇(5.4) ；
3、流速: 1 mL/min；
4、柱温: 28 C；
5、进样体积: 20 μL；
6、检测波长: 282 nm。

Waters--e2695

六、测定

在相同高效液相色谱条件下，依据保留时间对待测样品进行定性。

在相同高效液相色谱条件下，依据外标法进行定量。将标准工作液按照浓度由低到高的顺序进行测定，以峰面积对其相应浓度绘制标准曲线。待测样品的麦角甾醇响应值需在标准曲线的线性范围内。

样品结果及图谱

标准曲线

七、适用样品

适用样品灵芝(赤芝)子实体、菌丝体(干品)，及其制品孢子粉(破壁孢子粉)和灵芝孢子油等。

八、结果计算

按照公式计算待测样品中麦角甾醇的含量:

式中:

X—样品中麦角甾醇的含量，单位为微克每克(μg/g) ;

C—根据标准 曲线得出的麦角甾醇的浓度，单位为微克每毫升(μg/mL) ；

V—样品*终定容体积，单位为毫升(mL) ;

M—固体样品质量数值，单位为克(g)。

将符合重复性要求的三个独立测定值的算术平均值作为测定结果，保留小数点后两位数值。

九、精密度

在重复性条件下获得的三次独立测定结果的相对标准偏差不得超过5%。

十、质控说明

        （1） 进样前会先跑标准品，每个点进一针，保证重复性没有问题后才会跑样品。
        （2） 上样时每十个样进一个质控样（标样），一般进中间浓度的质控样，与原来的峰面积进行比较，如果峰面积偏差不超过10%则判断稳定性合格。