维生素E也叫生育酚,是一类脂溶性维生素,对于维持正常细胞结构、延缓细胞衰老和维持酶的活性非常重要。
可测指标 |
检测方法 |
样品 |
联系我们 |
维生素E |
邻菲罗啉比色法 |
鲜样 |
|
1、鲜样:请用自封袋密封好后常温或者冰袋邮寄,请您不要遗漏样品编号或者标签。
2、维生素E测定样品质量鲜样需样量为1g。
3、不同的组织部位,不同的样本类型含量差异较大,具体的样本量要求,请咨询我们的技术支持人员。
VE在菲啰啉的存在下,可使三价铁离子还原成二价铁离子,后者在特定的环境下可与菲啰啉形成粉红色复合物,通过比色,在标准曲线上可查出VE的含量,或者通过公式可计算出VE的含量。
1、样本前处理:10%匀浆上清液制备:准确称取组织重量,按重量(g):体积(mL)=1:9的比例加入试剂四(匀浆介质),冰水浴条件下匀浆,2500转/分离心10分钟,取上清待测。
2、组织匀浆中正庚烷维生素E的抽提(正庚烷试剂自备):
空白管 | 标准管 | 测定管 | |
10%匀浆上清液(mL) | - | - | 0.4 |
双蒸水(mL) | 0.7 | 0.6 | 0.4 |
12µg/mL VE标准应用液(mL) | - | 0.1 | - |
无水乙醇(mL) | 0.6 | 0.6 | 0.6 |
漩涡混匀20秒(蛋白沉淀) | |||
正庚烷(mL) | 1.2 | 1.2 | 1.2 |
漩涡混匀(充分抽提)1min,然后3000-4000转/分,离心5-10分钟,吸取上层正庚烷维生素E抽提液进行显色反应。
注:观察试管内液分为三层,*上层为正庚烷维生素E抽提液,第二层为水及无水乙醇,*下层为蛋白沉淀物。
3、显色反应:
空白管 | 标准管 | 测定管 | |
VE正庚烷抽提液(mL) | 0.8 | 0.8 | 0.8 |
试剂一(mL) | 0.1 | 0.1 | 0.1 |
试剂二(mL) | 0.05 | 0.05 | 0.05 |
混匀,立即记录时间,准确静置5min | |||
试剂三(mL) | 0.05 | 0.05 | 0.05 |
混匀(10秒左右) | |||
无水乙醇(mL) | 1 | 1 | 1 |
混匀,静置2min,波长533nm,光径1cm,无水乙醇调零,测定各管吸光度值。
独立公正 方法科学 规范严谨 服务周到