上海液质是一家拥有12000多种高端成熟型生化、elisa、土壤、植物、细胞等试剂盒的生产厂家，并承接生化代测，Elisa代测，HPLC 检测，GC检测，GC-MS 检测，LC-MS检测，ICP-MS检测 、土壤、植物、动物，成分酶活检测等科研检测服务。如有需要立即询购
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货号：UPLC-MS-4123
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规格：100T/96S
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微量法
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货号：UPLC-MS-4122
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规格：50T/48S
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紫外分光光度法
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产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。
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试剂名称
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规格
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保存条件
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试剂一
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液体 35 mL×1 瓶
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4℃保存
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试剂二
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液体 35 mL×1 瓶
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4℃保存
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试剂三
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自备
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4℃保存
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试剂四
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液体 34 mL×1 瓶
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4℃保存
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试剂五
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液体 1.5mL×1 支
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4℃保存
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试剂六
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液体 35 mL×1 瓶
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4℃保存
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溶液配制：
1. 试剂三：自备，石油醚，约需要 35mL。
2. 试剂四：该试剂具有强挥发性和一定的毒性，注意在通风橱操作并且每次用完用封口膜密封保存。
3. 试剂五：试剂有腐蚀性，注意防护。
产品说明：
木质素是构成植物细胞壁的成分之一，具有使细胞相连的作用。木质素存在于木质组织中，主要作用是通过形成交织网来硬化细胞壁，为次生壁主要成分。
木质素中的酚羟基发生乙酰化后在280nm处有特征吸收峰，280nm的吸光值高低与木质素含量正相关。
注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、微量石英比色皿/96孔UV板（非聚苯乙烯材质）、可调式移液枪、研钵、EP管、封口膜、冰乙酸、石油醚、30-50目筛和蒸馏水。
操作步骤：
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
样本 80℃烘干至恒重，研磨，过 30-50 目筛，称取约 3mg 于 1.5mLEP 管中。
二、测定步骤
1、 分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节波长至280nm，分光光度计用冰乙酸调零。
2、 操作表（在1.5mL离心管中依次加入下列试剂）：
乙酰化：
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测定管
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空白管
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样本（mg）
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3
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-
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试剂一（µL）
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300
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-
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65℃水浴反应30min。3000g，室温离心5min；去上清，留沉淀；
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试剂二（µL）
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300
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-
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涡旋震荡5min。3000g，常温离心5min；去上清，留沉淀；
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试剂三（µL）
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300
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-
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涡旋震荡5min。3000g，常温离心5min；去上清，留沉淀；
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试剂四（µL）
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300
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300
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试剂五（µL）
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12
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12
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充分混匀（封口膜密封，防止水分散失）。于80℃水浴锅水浴40min，进行乙酰化。每隔10min震荡30s，然后自然冷却至室温。
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试剂六（µL）
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300
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300
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充分混匀，于8000g，室温离心10min，取上清待测。
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三、木质素含量计算
1、按微量石英比色皿计算：
木质素含量（mg/g）=ΔA÷ε÷d×V检测÷（V上清×W÷V乙酰化）=1.3105×ΔA÷W 木质素的百分含量（%）=木质素含量÷1000×100%=0.13105×ΔA÷W
V乙酰化：乙酰化反应体积，0.612mL；ε：木质素消光系数，23.35mL/mg/cm；d：比色皿光径，1cm；V上清： 上清液体积，0.012mL；V检测：检测体积，0.6mL；W：样本质量，g；1000：换算系数，1g=1000mg。
2、按96孔UV板进行计算：
将上述公式中的d-1cm修改为d-0.6cm（96孔板光径）进行计算即可。
注意事项：
1、 试剂四有毒性，请操作时做好防护措施，加热前必须用封口膜密封，以防气体溢出。
2、 加热过程中有剧烈反应，震荡时轻摇，以免压力过大喷出造成人身伤害。
3、 冰乙酸具有强刺激性，建议操作过程全部在通风橱内操作。
4、 取上清加冰乙酸步骤根据自己样本乙酰化程度，冰乙酸的用量可调整，保证吸光值在0.1-0.8之间即可， 并在公式中参与计算。
5、 由于冰乙酸具有挥发性，建议用比色皿进行测定实验。实验混匀后必须立即测定！
生化检测
液相（HPLC）检测
