问题分析

问题描述

可能原因

相应对策

标准曲线梯度差

吸液或加液不准

检查移液器及吸头

标准品稀释不正确

溶解标准品时稍微旋转瓶身，轻轻混匀使粉末完全溶解

洗涤不完全

保证洗涤时间和洗涤次数及每孔的加液量

显色很弱或无色

孵育时间太短

保证充足的孵育时间

实验温度不正确

使用推荐的实验温度

试剂体积不够或漏加

检查吸液及加液过程，保证所有试剂按顺序足量添加

稀释不正确

酶标记物失活或底物失效

混合酶结合物和底物，通过迅速显色来检查判断

读数数值低

酶标仪设置不正确

在酶标仪上检查波长及滤光片设置

提前打开酶标仪预热

变异系数大

加液不正确

检查加液情况

背景值高

检测抗体的工作浓度过高

使用推荐的稀释倍数

酶标板洗涤不完全

保证每步清洗完全；如果用自动洗板机，请检查所有的出口是否有堵塞；是否使用试剂盒配备的洗涤液

洗液有污染

配制新鲜的洗液

灵敏度低

ELISA试剂盒保存不当

按说明书要求保存相关试剂

读数前未终止

OD读数前应在每孔中加入终止液