目的
为生化指标检测中动物组织样本的采集、储存等操作提供参考。
适用范围
适用于酶活及含量动物组织的采集及储存。
操作流程:
1. 材料准备
材料
型号或级别
实验服、手套、口罩等防护设施
医用级
手术器械
医用级
冻存管
建议使用无菌级管
记号笔
务必使用油性记号笔
液氮
冰箱
-80℃
2. 采集 切割下目标组织样本,用生理盐水清洗残留血液,滤纸吸干表面液体;
3. 剪碎 在冰上将组织样本切割成 20~50 mg 左右的小块,根据组织样本类型适当调整;
4. 速冻 采用铝箔纸包括组织块,置于液氮中速冻约10s,根据组织块的大小做适当调整,在组织切除和处理30 min内进行速冻;
5. 分装 将速冻后的组织块分装至冻存管中,做好标记;
6. 储存 速冻后的组织转运储存于液氮或-80℃冰箱中。
样本量要求
组织样本需≥200 mg/指标。
储存及运输
样本应储存于液氮或-80℃冰箱中。运输过程中应全程保持低温,建议使用干冰冷冻运输。
注意事项
1. 材料 手术器械、容器等材料必须保持洁净,避免污染;
2. 代表性 取样需要具有代表性,且取样部位应一致;
3. 快速原则 由于代谢物在体内代谢速度快,请务必提前设计准备好实验和材料,快速取样和预处理;
4. 低温原则 在采集、处理及运输过程中,请全程保持低温;
5. 一致性原则 在实验设计和取样的过程中,保持一致性。
a)设计一致性,不同样品除了需研究的内容不一致,其它都保持一致,尤其是取样部位;
b)时间一致性,采样时间应控制在同一时间范围内;
c)预处理一致性,即所有样品的预处理方法、试剂等均保持一致;
6. 动物样本若需要使用麻醉剂,建议使用异氟醚;
7. 要避免血液污染,采用去离子水或等渗溶液漂洗干净;
8. 大块组织需要切成小块,方便储存和取样;
9. 避免反复冻融;
10. 样本编号一定要清楚、牢固,防止在冷冻过程中编号丢失。