产品内容：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。
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试剂名称
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规格
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保存条件
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试剂一
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液体 30mL×1 瓶
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4℃保存
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试剂二
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液体 10mL×1 瓶
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4℃保存
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产品说明：
总胆红素（Total bilirubin，TBil）是直接胆红素和间接胆红素的总和。血清总胆红素的测定是肝、胆功能检查中的一项重要检测项目。能准确地反映黄疸的程度，对临床诊断隐性黄疸有重要意义。在表面活性剂的存在下， 总胆红素能被亚硝酸钠氧化，生成胆绿素。通过检测 450nm 下波长变化，可计算出总胆红素的含量。
注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、低温离心机、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96 孔板、冰和蒸馏水。
操作步骤：
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
血清、血浆等液体样本：直接测定。若有浑浊可以离心后取上清进行测定。
二、测定步骤
1、 分光光度计/酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 450nm，分光光度计蒸馏水调零。
2、 按下表步骤加样（在 EP 管或者 96 孔板上加入下列试剂）：
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试剂名称（μL）
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测定管
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空白管
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样本
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20
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蒸馏水
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20
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试剂一
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240
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240
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充分混匀，37℃避光孵育 5min，测定 450nm 处吸光度，分别记为 A1 测定、A1 空白
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试剂二
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60
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60
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充分混匀，37℃避光反应 5min，测定 450nm 处吸光度，分别记为 A2 测定、A2 空白；ΔA 测定=A1 测定-A2 测定；ΔA 空白=A1 空白-A2 空白。空白管只需测 1-2 次。
（使用比色皿反应时，第一步 5min 反应完成将液体倒入比色皿比色后，可直接在比色皿中加入试剂二混合均
匀反应 5min 直接进行测定；使用 96 孔板反应时，可以将上述试剂直接加入 96 孔板中反应第一步的 5min，之后直接加入试剂二进行第二步反应）
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生化检测
液相（HPLC）检测
